Dosage à haut débit de la prolifération de cellules en culture primaire : validation et application du kit "CyQuant® NF" aux cellules de nageoires de poisson rouge

Résumé

L’utilisation du kit CyQuant® NF pour des comptages cellulaires à haut débit et pour des mesures de proliférations a été testée sur des cellules de nageoires de poisson rouge issues de culture primaire, comme une alternative aux lourds comptages manuels sur cellules de Malassez. Nous montrons que le dosage présente, pour nos cellules, une très bonne répétabilité intra et interdosage. Une forte corrélation linéaire (r² = 0, 999) est obtenue entre le nombre de cellules par puits et l’intensité de fluorescence du CyQuant® lié à l’ADN des cellules. L’établissement d’une équation basée sur un grand nombre de données permet une traduction rapide du signal CyQuant® en concentration de cellules. Le dosage est également applicable à l’étude de la prolifération des cellules de nageoires en microplaque si les densités d’ensemencement initiales sont comprises entre 20 000 et 35 000 cellules par puits. En conclusion, le dosage CyQuant® NF représente un outil idéal pour réaliser des comptages de routine de grandes séries d’échantillons et des mesures d’activité proliférative sur des cultures primaires de cellules de poisson.