Évaluation de la fluidité de la membrane plasmique avec la sonde fluorescente di-4-ANEPPDHQ. Adaptation de la technique de recouvrement de fluorescence après photoblanchiment (FRAP) sur cellules végétales en suspension

Résumé

Au cours de l’interaction entre plantes et microorganismes, la membrane plasmique joue un rôle essentiel dans l’organisation précoce des mécanismes de réactions de défense mises en place par la plante. L’équipe Dynamique membranaire et réponse aux stress biotiques, de l’UMR Plante-Microbe-Environnement, s’intéresse aux modifications des propriétés du plasmalemme des cellules végétales dans ce type d’interactions. La fluidité membranaire est une de ces propriétés. La technique de retour de fluorescence après photoblanchiment (FRAP), réalisée à l’aide d’un microscope confocal à balayage laser, a été adaptée à l’étude des variations de la fluidité de la membrane plasmique de cellules BY-2 de tabac en suspension, marquées par une sonde fluorescente, la di-4-ANEPPDHQ, s’insérant dans un des feuillets de la membrane plasmique. Nous proposons ici un protocole optimisé d’acquisition et d’analyse des données issues de cette méthodologie FRAP.