Simplification de la méthode de préparation des embryons équins avant cryoconservation par vitrification

Résumé

La cryoconservation d’embryons associée au transfert d’embryons est une biotechnologie de la reproduction très utile pour la filière équine. Jusqu’à présent, la technique conventionnelle utilisée nécessitait l’achat d’un matériel coûteux et un long apprentissage technique. Outre un microscope et deux micromanipulateurs, deux sortes de micropipettes reliées à des seringues à vis étaient nécessaires, une pour maintenir l’embryon sous aspiration d’air et une, sous huile. Ces contraintes rendaient cette technique difficilement utilisable sur le terrain par les centres de collectes et de transferts de la filière équine. À INRAE Nouzilly, nous avons développé une technique dont le principe est basé sur l’introduction à main levée d’une micropipette à travers la capsule de l’embryon, sous loupe. Elle est suivie du retrait du liquide blastocœlique, toujours à main levée, sous loupe, via cette micropipette, dite d’aspiration, sous huile, tenue par l’opérateur et reliée à une seringue à vis. Cette technique a fait l’objet d’une déclaration d’invention et d’innovation. Nous avons montré qu’elle pouvait être facilement prise en main par un technicien de laboratoire novice en micro manipulation d’embryons et qu’elle permettait d’obtenir d’aussi bons résultats de survie embryonnaire in vitro que la technique conventionnelle. Ces deux atouts permettent d’envisager une utilisation aisée et efficace par les centres de collectes/transferts d’embryons équins et la filière équine en général.