Technique d’extraction d’ADN génomique de végétaux permettant l’amplification de longs fragments à partir d’une petite quantité de matériel

Résumé

L’extraction d’ADN génomique à partir d’une faible quantité de matériel végétal est couramment réalisée à l’aide de kits commerciaux qui ont pour avantage la rapidité, la reproductivité et l’absence d’utilisation de solvants toxiques. Ces kits sont efficaces lorsque les échantillons obtenus sont destinés à des amplifications par PCR de fragments de petite taille. Étant dans l’obligation d’amplifier par PCR (polymerase chain reaction) un fragment d’ADN de grande taille (> 3kpb), nous avons mis au point le protocole décrit dans cet article qui nous permet d’extraire sur de petites quantités de matériel végétal de l’ADN de haut poids moléculaire. Nos résultats montrent que l’amplification PCR attendue peut être réalisée sur nos échantillons, et que ces derniers se conservent bien dans le temps. Nous montrons aussi que ce protocole peut être appliqué à d’autres espèces végétales. De plus, le coût par échantillon est réduit par rapport à une extraction réalisée avec un kit d’un fournisseur de laboratoire.